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细胞划痕愈合分析

细胞划痕愈合实验基本概况

细胞伤口愈合实验或划痕实验是研究体外集体细胞迁移的常用方法。该方法基于以下观察:在汇合的细胞单层上产生人工间隙(“划痕”)后,划痕边缘的细胞将向开口迁移并建立新的细胞-细胞连接,从而愈合间隙/划痕。伤口愈合测定的初始步骤包括在细胞单层中创建划痕,随后在多个时间点捕获图像以监测间隙闭合的进展,以及间隙闭合百分比和/或细胞迁移率的量化1。

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研究人员可以使用这些 CytoSMART 设备进行伤口愈合实验:全板扫描 Omni Omni 箱内高内涵活细胞成像仪 、荧光成像 Lux3 FL 箱内荧光活细胞成像仪箱内荧光活细胞成像仪、智能小巧 Lux2 Lux 2 活细胞成像仪 Lux3 BR 箱内高分辨活细胞成像仪。

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使用箱内活细胞成像仪进行伤口愈合实验分析

使用全板扫描 CytoSMART Omni 箱内高内涵活细胞成像仪的功能,用户可以研究多孔板中细胞的迁移模式并比较多种处理条件。在本次的案例中,进行了伤口愈合试验以研究 C6 大鼠神经胶质瘤细胞的迁移过程。 CytoSMART Omni 允许用户可视化划痕闭合的进程,提供多个孔板的概览(图 1A)以及放大选定的孔板或划痕区域(图 1A;图 2))。集成的图像分析算法会自动突出显示(蓝色;图 1A)缺少细胞的孔板区域,同时还可量化划痕表面闭合(图 1B)和细胞迁移速度(图 1C)。

细胞划痕分析结果-CytoSmart 活细胞成像仪
图 1 | C6 胶质瘤细胞迁移分析

1 |C6 胶质瘤细胞迁移分析。将 C6 大鼠神经胶质瘤细胞接种在 48 孔板中,用移液器吸头划开划痕,并使用 CytoSMART Omni 箱内高内涵活细胞成像仪监测 17 小时。 (A) 集成图像分析算法自动选择无细胞(划痕)区域(以蓝色突出显示)并监控在指定时间段内划痕闭合的进展情况。 生成的输出视频提供了有关 (B) 划痕随时间变化的区域和 (C) 细胞迁移速度的信息。 (B) (C) 显示 (A) 中所示的四口孔板的划痕闭合数据。


2 | C6 神经胶质瘤细胞迁移和划痕闭合的延时视频。将单层 C6 大鼠神经胶质瘤细胞铺在 48 孔板的一个孔中,用移液器吸头划开伤痕,并通过使用 CytoSMART Omni 设备的全孔概览进行记录。每小时采集一次明场图像,共持续 23 小时。


划痕实验 - CytoSMART Lux2 视频示例

在29小时内(1张图像/ 10分钟)跟踪C6大鼠神经胶质瘤细胞的迁移。


参考文献

1. Liang, C.-C., Park, A. Y. & Guan, J.-L. In vitro scratch assay: a convenient and inexpensive method for analysis of cell migration in vitro. Nat. Protoc. 2, 329–333 (2007).


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